Ca2+钙离子染色试剂盒-F07，橙红色荧光

产品简介：

 F07 细胞内钙离子染色试剂盒是利用 F 系列 Ca2+钙离子荧光探针进行钙离子特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的 F07 细胞内钙离子染色探针为橙红色荧光标记的钙离子探针，具有 550 / 581nm 的最大激发/发射波长。

 F07 具有极高的细胞渗透性，经过简单孵育即可实现细胞加载。穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成不易透过细胞膜的 F07 新产物，从而被滞留在细胞内。F07 游离配体几乎是非荧光性的，其荧光不会随钙离子浓度升高而增强。但是，当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光，荧光会增加 60 至 100 倍，被激发后可以发出橙红色的荧光，具有很高的淬灭常数和激发态寿命。最大激发波长为 550nm，最大发射波长为 581nm。可以使用荧光显微镜、酶标仪、激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。

 F07 荧光探针采用可见光激发，与传统的紫外光激发的荧光探针相比，仪器的适用范围更广泛，具有更强的探针吸收性能，使得更低浓度的探针即可成功检测 Ca2+变化，从而降低了对活细胞的光毒性，检测敏感度更高。

 F 系列钙离子探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的橙红色荧光探针，还可以提供绿色、红色等其他颜色的染色试剂盒。

 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内 pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。

 可以为您提供各种颜色的 M 系列、N 系列、L 系列、E系列、G 系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。

 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

 以 96 孔板每孔 200 μl 染色液计，本试剂盒小包装可以染色 50-500 个样本。

产品应用：

流式细胞仪/荧光显微镜/激光共聚焦

使用方法：

1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。

2.F07 染色液为 DMSO 溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。

3.使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使 DMSO 溶液集中于管底。

4.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

5.标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。

6.染色后立即进行分析。

7.本染色液可用于细胞涂片、细胞的检测。

8.可以在染色溶液中加入等体积的 20% Pluronic F127 溶液，Pluronic F127 可以帮助 F04 探针更快进入细胞，不建议在 Pluronic F127 中长期保存 F04 探针。

9.由于 F07 探针在水中的稳定性比较差，染色工作液必须现配现用，并且在当天用完。

10.F07 探针对湿度比较敏感，每次取完需要量后，必须紧紧密封盖子。建议根据单次用量，分装密封保存。

不可使用含水的吸头。

11.试剂 A 母液请拧紧螺旋盖，避免受潮失效。

1． 染色工作液的配制：

根据样本数量，用 37℃培养箱预热的 HBSS 将 F07 荧光染料 200-1000 倍稀释，配制成染色工作液。

2． 细胞染色

悬浮细胞染色

1) 用 PBS 洗涤细胞 2 次。

2) 加入适量体积的染色工作液重悬细胞，使其密度大约为 1×106/mL。

3) 在 37 ℃孵育细胞 20 分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用 20 分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。

4) 加入 5 倍体积的含有 1%胎牛血清的 HBSS，再继续孵育 40 分钟。

5) 孵育结束，500×g 离心 5 分钟。

6) 弃上清液，再次缓慢加入 37℃预热的 HBSS 重悬细胞。

7) 重复（5），（6）步骤两次。

8) 加入 HBSS 重悬细胞，在 37℃下再继续孵育 30 分钟。

9) 然后用该细胞进行荧光钙离子检测。

贴壁细胞染色

1) 用 PBS 洗涤细胞 2 次。

2) 细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的染色工作液。

3) 37 ℃孵育细胞 20-60 分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用 20 分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。

4) 吸干染色工作液，用 HBSS 洗培养板或盖玻片 2～3 次，每次用预热的 HBSS 覆盖所有细胞，然后吸干培养基。

5) 加入 HBSS，在 37℃下再继续孵育 30 分钟。

6) 然后用该细胞进行荧光钙离子检测。

3． 用荧光显微镜或流式细胞仪检测

激发波长为 550nm，最大发射波长为 581nm。

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。