细胞铁检测试剂盒

产品简介：

铁是人体必需微量元素，总含量约为 3270mg，铁分布较广，有 67.6%的铁作为血红蛋白分子的辅基分布于血红蛋白中，参与铁的运输；骨骼和肌红蛋白中各存在 2.59%和 4.15%，储存铁约占 25.37%血清中铁均以三价铁离子形式与转铁蛋白结合，因此测定血清铁时，首先需要 Fe3+与转铁蛋白分离。 

 细胞铁检测试剂盒(亚铁嗪微板法)是采用分光光度法以亚铁嗪为底物进行铁的检测，在酸性介质中与转铁蛋白结合的血清铁从转铁蛋白中解离出来，其他样品中的铁在酸性介质环境下也会被解离，再被还原剂还原为 Fe2+，后者与亚铁嗪生成紫红色化合物，通过酶标仪检测 562 nm 处吸光度，适用于检测细胞样品中的铁含量。

 上述检测方法属于直接检测法，应设空白，纠正样本本身的色度，根据公式计算出铁含量，该检测试剂盒在 140 μmol/L 以下线性关系良好，甘油三脂≤3.39 mmol/L，胆红素≤171μmol/L，对本法基本无干扰。

 本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

 可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内 pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。

可以为您提供各种细胞成像、细胞示踪与追踪试剂盒产品。包括各种颜色的 M 系列、N 系列、L 系列、E 系列、G 系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。

 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

 可以提供各种细胞、组织染色，免疫组织化学，细胞培养等相关试剂盒产品。

产品应用：

酶标仪

使用方法：

1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

2.如果样品浓度过高，应用双蒸水稀释后再检测，结果乘以稀释倍数；

3.实验过程中用到的水，不可用普通的蒸馏水，尽量采用纯水；

4.玻璃器材需要 10%的盐酸浸泡 24h，取出后用去离子水冲洗后才可以使用；

5.避免与铁器接触，防止铁污染；

6.标准品呈色 24h 稳定，随着时间的延长，颜色会慢慢加深，应在 1h 内检测完毕；

7.0.97 位体积校正值。

一、 样本处理

先收集细胞到离心管内，离心后弃上清；按照 1-10*106 个细胞数量加入 500 μl 体积提取液 F，匀浆器或超声破碎细胞（冰浴，功率 20%或 200 W，超声 3 s，间隔 10 s，重复 30 次）； 8000g 4℃离心 10 min，取上清，置冰上待测。 

二、 铁标准工作液的配制

取适量的铁标准（100 μg/ml），按铁标准（100 μg/ml）：铁标准稀释液=1:49 的比例配制铁标准（2 μg/ml），即为铁标准工作液。2~8℃避光保存，3 个月有效。

三、 铁的加样

选用经稀酸处理及去离子水清洁的 96 孔板，按照下表设置空白孔、标准孔、样品孔，溶液应按照顺序依次加入，并避免产生气泡。如果样品中铁离子含量过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测最好能设置平行孔。

混匀，室温静置 15 min 或 37℃孵育 10 min。

以空白孔调零，酶标仪 562 nm 处检测标准孔、样品孔的吸光度，1 h 内检测完毕。

四、 计算公式

铁（μmol/g）＝（[A 样品-（A 空白 x 0.97）] / A 标准）x 35.8 / 待测样品的蛋白浓度（g/L）

【注】：

A 样品：样品孔加入显色液后测定的吸光度；

A 空白：样品孔未加入显色液前测定的吸光度；

A 标准：标准孔的吸光度；

0.97： 体积校正值。

单位换算：铁标准（2 μg/ml）=铁标准（35.8 μmol/L）

 μg/dl=μmol/L/0.179

 μmol/L=0.179 x μg/dl=17.9 x μg/ml

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。