黄嘌呤氧化酶(XOD)检测试剂盒
产品简介:
黄嘌呤氧化酶(XOD)检测试剂盒是利用 XOD 催化黄嘌呤产生尿酸,尿酸在 290nm 下有特征吸收峰,吸光值反映了黄嘌呤氧化酶含量。
黄嘌呤氧化酶(XOD)催化黄嘌呤氧化生成尿酸和超氧阴离子,是活性氧主要来源之一;同时 也是核苷酸代谢的关键酶之一。XOD 主要分布于哺乳动物的心,肺,肝脏等组织中,当肝 功能受损时,XOD 大量释放到血清中,对肝损害的诊断具有特异性的意义。
可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内 pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。
可以为您提供各种细胞成像、细胞示踪与追踪试剂盒产品。包括各种颜色的 M 系列、N 系列、L 系列、E 系列、G 系列等细胞膜、细胞质、细胞
核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
可以提供各种细胞、组织染色,免疫组织化学,细胞培养等相关试剂盒产品。
产品应用:
分光光度计
使用方法:
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.正式测定前,请务必取 2~3 个预期差异较大的样本做下预实验。
一、 样本处理
1、 细胞、组织或细菌样品的制备:
培养细胞或细菌:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量 (104 个):提取液 A 体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液 A),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次); 8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
组织:
按照组织质量(g):提取液 A 体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织, 加入 1mL 提取液A),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、 血清(浆)样品:直接检测。
二、 XOD 检测工作液的配制
用时在每瓶试剂 C 中加入 15mL 试剂 B,充分混匀,现配现用;
三、 样本测定
1. 打开分光光度计,预热 30min 以上,调节检测波长至 290nm,纯水调零;
2. 测定前将 XOD 检测工作液 37 ( ℃ 哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min。
3. 取 1mLXOD 检测工作液于 1mL 石英比色皿中,再加入 35μL 样本,混匀,室温下立即测定 290nm 下的初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2,计算 ΔA=A2-A1。
四、 计算公式
1、 血清(浆)XOD 计算:
单位的定义:每毫升血清(浆)每分钟催化产生 1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。
XOD(nmol/min/mL)
=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109 ]÷V 样÷T
=2424×ΔA
2、组织、细菌或细胞中 XOD 计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。 XOD(nmol/min/mg prot)
=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109 ]÷(V 样×Cpr)÷T
=2424×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每 g 组织每分钟催化产生 1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。
XOD(nmol/min/g 鲜重)
=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109 ]÷(W ×V 样÷V 样总)÷T
=2424×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每一万个细菌或细胞每分钟催化产生 1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。
XOD(nmol/min/104 cell)
=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109 ]÷(500×V 样÷V 样总)÷T
=4.848×ΔA
V 反总:反应体系总体积,1.035×10-3 L;
ε:尿酸摩尔消光系数,1.22×104 L/ mol /cm;
d: 比色皿光径,1cm;
V 样:加入样本体积,0.05 mL;
V 样总:加入提取液体积,1 mL;
T: 反应时间,1 min;
W:样本质量,g;
Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;
500:细胞或细菌总数,500 万。
注意事项:该产品仅供科研实验使用,未经允许不得用于其它用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。