胆碱酯酶(ChE)检测试剂盒

产品简介：

胆碱酯酶(cholinesterase，ChE)属于特异性酯酶，可分为两大类。一类是乙酰胆碱酯酶(Acetyl cholinesterase，EC 3.1.1.7, AChE)又称为真性胆碱酯酶，能水解乙酰胆碱，起到生理的 调 节 作 用 ； 另 一 类 为 胆 碱 酯 酶 ， 又 称 假 性 胆 碱 酯 酶 (Pseudo cholinesterase ，3.1.1.8，PsChE)或拟胆碱酯酶，能水解胆碱的酯而不能水解乙酰胆碱酯。乙酰胆碱酯酶主要存在于神经元的胞质内、神经与肌肉接头处即所谓运动终板处；PsChE 主要存在于血浆、胰腺、唾液腺内，生理功能尚不明确。测定胆碱酯酶可以判断有机磷中毒的程度，鉴定遗传性胆碱酯酶变异，肝实质性损害程度。

 胆碱脂酶主要在肝细胞中产生,主要用于估计肝脏的储备能力和肝脏疾病的预后。肝脏疾病时活力常降低，降低程度往往与病情严重程度有关。肝硬化代偿期活力明显下降，在肝昏迷时最为显著，但在阻塞性黄疸时无改变。阿米巴肝脓肿此酶下降明显，治疗后在短期内迅速恢复正常，帮对阿米巴肝病研究有一定帮助。在一些肝外疾患，如全身营养不良，重度贫血、癌症、晚期血吸虫病、败血病、重症结核病（尤其是肾结核或浆膜结核）等均可中度或重度降低，此酶增高见于肾病综合症、甲状腺机能亢进、糖尿病、高血压、高血脂。

 胆碱酯酶(ChE)检测试剂盒（羟胺氯化铁比色法）其检测原理是待测样品中的胆碱酯酶能催化酶底物水解。剩余的酶底物与羟胺作用生成羟胺化合物，后者与三价铁离子结合生成呈棕色复合物，通过检测 540nm 处吸光度，即可测出 ChE 活力。

 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内 pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。

 可以为您提供各种颜色的 M 系列、N 系列、L 系列、E系列、G 系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。

产品应用：

微孔板，酶标仪

使用方法：

一、试剂的前处理：

80umol/ml 酶底物储备液的配制：

将 1 支酶底物粉剂 B1 倒入 5ml 稀释液 B2 中溶解，4℃保存。

8umol/ml 酶底物工作液的配制：

按储备液：试剂 A=1：9 的比例进行稀释，现配现用。

试剂 C 工作液的配制：

临用前将粉剂 C1 倒入液体 C2 中，充分摇匀，根据使用量将刚配制好的混合液与 C3 等量混合，充分混匀，现配现用。

试剂 F 的配制：

临用前，将稀释液 F2 倒入粉剂 F1 中，充分混匀溶解后备用。

二、样本的前处理：

1. 血清（浆）：直接进行检测；

2. 组织样本：

准确称取样本的重量，按照重量（g）：体积（ml）=1:9 的比例，加入 9 倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，制成 10%匀浆，2000g，离心 10 分钟，取上清待测。同时用 BCA 或考马斯亮蓝或双缩脲试剂测定组织蛋白浓度。

3. 全血样本：

轻轻颠倒肝素抗凝全血使其均匀后取 0.1ml，再加入 0.4ml 冷纯水，充分混匀 1 分钟，静置 15 分钟，制备的 5倍溶血液对光观察澄清透亮待测。 

三、 血清（浆）、组织样本操作步骤：

在 1.5ml 离心管中按下表添加试剂进行反应：

【注】：

37℃反应时可以水浴也可以置培养箱。

充分混匀，3000g 离心 10 分钟，吸取 200ul 上清加入 96 孔板。。

空白孔调零，波长 520nm 处测定各孔的吸光度值。

四、全血样本的操作表

【注】：

37℃反应时可以水浴也可以置培养箱。

充分混匀，3000g 离心 10 分钟，吸取 200ul 上清加入 96 孔板。

空白孔调零，波长 520nm 处测定各孔的吸光度值。

五、计算：

（一）血清样本计算：

1. 定义：

每毫升血清与底物在 37℃作用 20 分钟，分解产生 1umol 酶底物为 1 个酶活力单位。

2. 计算公式：

血清中 CHE 活力 = 对照孔 OD 值-测定孔 OD 值 x 标准品浓度 x 1ml 

 （U/ml） 对照 OD 值 （8umol/ml） 取样量 0.025ml

（二）组织样本计算：

1. 定义：

每毫克蛋白组织与底物在 37℃作用 20 分钟，分解产生 1umol 酶底物为 1 个酶活力单位。

2. 计算公式：

组织中 CHE 活力 = 对照孔 OD 值-测定孔 OD 值 x 标准品浓度 x 1ml 

 （U/ mgprot） 对照 OD 值 （8umol/ml） 取样量 0.025ml

 ÷ 待测样本的蛋白浓度

 （mgprot/ml）

【注】：

 U/ mgprot 为 ChE 活力单位/毫克蛋白

（三）全血样本计算：

1. 定义：

每毫升全血与底物在 37℃作用 20 分钟，分解产生 1umol 酶底物为 1 个酶活力单位。

2. 计算公式：

全血中 CHE 活力 = 对照孔 OD 值-测定孔 OD 值 x 标准品浓度 x 1ml 

 （U/ml） 对照 OD 值 （8umol/ml） 取样量 0.05ml

 X 样本测试前的稀释倍数

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。