脂肪酶(LPS)检测试剂盒

产品简介：

人体脂肪酶主要来源于胰腺。血清 LPS 得到增高常见于急性胰腺炎及胰腺癌，偶见于慢性胰腺炎。急性胰腺炎时血清淀粉酶增高时间较短，而血清 LPS 的升高可持续 10-15 天。腮腺炎时，LPS 通常在正常范围，因而 LPS 对急性胰腺炎的研究更具有特异性。脂肪酶基本组成单位仅为氨基酸，通常只有一条多肽链。它的催化活性仅仅决定于它的蛋白质结构。脂肪酶是分解脂肪的酶，测定血清脂肪酶主要用于对急性胰腺炎的研究。

 甘油三脂和水制成的乳胶，因其胶束对入射光的吸收及散射而具有乳浊性状。底物在脂肪酶作用下发生水解，使胶束分裂，散射光或浊度因而减低，减低的速率与脂及酶活力有关。

 本试剂盒利用 LPS 催化油脂水解成脂肪酸，利用铜皂法测定脂肪酸生成速率，即可计算LPS 的活性。

 本试剂盒适用于测定各种动物血清（浆）、组织、细胞、细菌等样本中 LPS 的活性。

 可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内 pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。

 可以为您提供各种颜色的 M 系列、N 系列、L 系列、E系列、G 系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。

 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

产品应用：

分光光度计

使用方法：

1.试剂 A 和 B 临用前 37℃预温后使用；

2.所有试剂在使用前均需放置至室温。

3.试剂 B 每次使用前用震荡混匀器剧烈震荡 20min

试剂准备：

 所有试剂在使用前均需放置至室温。

甲苯 100ml 自备

试剂 B 每次使用前用震荡混匀器剧烈震荡 20min

试剂 D 使用前加入 3.168ml 的甲苯

样本的前处理

1. 血清等液体：直接检测；

2. 组织：按组织重量（g）：试剂 A（ml）=1:5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 试剂 A）进行冰浴匀浆。12000g，4℃离心 10 分钟，取上清置冰上待测；

3. 细菌、真菌：按细胞数量（104 个）：试剂 A（ml）=500~1000:1 的比例（建议 500 万细胞加入 1ml 试剂

A），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3 分钟）；然后 12000g，4℃离心 10分钟，取上清置冰上待测。

LPS 测定：

1. 预热分光光度计 30min 以上，调节波长至 710nm，蒸馏水调零；

2. 试剂 A 和 B 置于 37℃水浴预热 30min 以上；

3. 在 5ml 离心管中依次加入下列试剂

37℃振荡反应 5min 后，静置 5min，取 800ul 上层液加入 1ml 玻璃比色皿，710nm 处测定各管吸光度。

备注：空白管和标准管只需要测定一次。

LPS 活性计算：

1.组织、细菌或细胞的 LPS 活性：

（1）按蛋白浓度计算：

活性单位定义：37℃中每毫克蛋白每分钟水解橄榄油生成 1umol 脂肪酸为一个酶活力单位；

LPS（umol/min/mg prot）=C 标准液 X (A 样品-A 空白) x V 反总 ÷T

 A 标准-A 空白 Cpr x V 样

 = 16 X A 样品-A 空白 ÷ Cpr

 A 标准-A 空白 

(2)按样本质量计算：

活性单位定义：37℃中每克组织每分钟水解橄榄油生成 1umol 脂肪酸为一个酶活力单位；

LPS（umol/min/g 鲜重）=C 标准液 X (A 样品-A 空白) x V 反总 ÷T

 A 标准-A 空白 （W X V 样÷V 样总）

 = 16 X A 样品-A 空白 ÷ W

 A 标准-A 空白 

（3）按细菌或者细胞数量计算：

活性单位定义：37℃中每 104 个细胞每分钟水解橄榄油生成 1umol 脂肪酸为一个酶活力单位；

LPS（umol/min/104cell）=C 标准液 X (A 样品-A 空白) x V 反总 ÷T

 A 标准-A 空白 （细胞数量 x V 样÷V 样总）

 = 16 X A 样品-A 空白 ÷ 细胞数量

 A 标准-A 空白 

2.血清等液体 LPS 活性的检测：

活性单位定义：37℃中每毫升血清每分钟水解橄榄油生成 1umol 脂肪酸为一个酶活力单位；

LPS（umol/min/ml）=C 标准液 X (A 样品-A 空白) x V 反总 ÷T

 A 标准-A 空白 V 样

 = 16 X A 样品-A 空白 

 A 标准-A 空白

【注】： 

C 标准液：10umol/ml；

V 反总：反应总体积，2ml；

V 样：反应种加入样本体积，0.125ml；

V 样总：加入提取液体积，1ml；

Cpr：上清液蛋白浓度，mg/ml；需另外测定，建议用 BCA 蛋白定量试剂盒；

W：样本质量，g；

T：催化反应时间，10min。

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。