天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒

产品简介：

转氨酶是催化 α-氨基酸和 α-酮酸之间氨基转换反应的一组酶，天门冬氨酸氨基转移酶(AST)旧称谷草转氨酶(GOT)主要存在于心肌、骨骼肌、肝脏，以心肌含量最高，肝脏次之。AST 能够催化天门冬氨酸和 a-酮戊二酸的氨基转移作用，形成谷氨酸和草酰乙酸。 

 天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(赖氏微板法)其检测原理是天门冬氨酸氨基转移酶(AST)催化天门冬氨酸与 α-酮戊二酸之间的氨基转移反应，在 ALT 催化下，其反应公式如下：

L-天门冬氨酸+α-酮戊二酸→草酰乙酸+L-谷氨酸

 二硝基苯肼与 α-酮酸反应，生成相应的二硝基苯腙，在碱性条件下，二硝基苯腙的吸收光谱有差异，通过分光光度计检测在 500-520nm 处差异最大，以等摩尔浓度计算出丙酮酸的生成量，进而计算酶的活性。100T 该检测试剂盒可检测 50 个样本（不含标准品）。

 本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内 pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。

 可以为您提供各种颜色的 M 系列、N 系列、L 系列、E系列、G 系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色

试剂盒产品。

 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

产品应用：

微孔板，酶标仪

使用方法：

1.二硝基苯肼显色液溶解以后，如果仍然有结晶析出，应弃用。 

2.由于赖氏法的特点，在绘制标准曲线时每个点最好做三管的重复测定，求出各标准管的吸光度均值，减去“0”号管吸光度均值后，对照赖氏单位绘制标准曲线。 

3.血清中 AST 活性在室温可以保存 2 天，4℃保存 1 周，-20℃保存 1 个月。 

4.成批样本测定时，一般无需每份样本都做自身血清对照，以试剂空白管代替即可。但对于超过正常范围的血清样本，应该进行复测。复测时，每份样本都应做自身血清对照。

5.严重黄疸、脂血或溶血的血清，可能会引起测定管吸光度增高，因此检测该类样本时应做自身血清标本对照。 

6.当样本的酶活力大于 190 卡门单位时，应将样本进行 5-10 倍稀释后再进行测定。

准备样品： 

① 血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃保存 1 个月有效，用于 AST/GOT 的检测。 

② 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃保存 1 个月有效，用于 AST/GOT 的检测。 

③ (选做)样品准备完毕后可以用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的 AST/GOT 含量。

制作 AST 标准曲线：

1. 取丙酮酸标准品一支，准确加入丙酮酸标准品稀释液 1ml，配制成丙酮酸标准品 100mM，4℃保存备用。

2. 临用前，取适量 100mM 丙酮酸标准品和标准品稀释液按 1：49 的比例混合，配制成 2mM 的丙酮酸标准

品。

3. 按下表制备标准曲线。

4. 混匀，向各管中加入二硝基苯肼显色液 20ul，混匀 37℃孵育 20 分钟后，加入 AST 显色基液 200μl，混匀。

5. 室温放置 5 分钟，酶标仪 505nm 处，以蒸馏水调零，读取各孔吸光度。各孔吸光度均减去”0”号孔吸光度，所得吸光度差值(纵坐标)与对应的卡门酶活力单位(横坐标)作图。 

AST 酶促反应：

1. 按照下表设置对照孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

2. AST 检测：混匀，室温放置 5min。酶标仪 505nm 处检测吸光度，以蒸馏水调零，读取各孔吸光度值。

计算： 

 以标准孔活力单位为横坐标，以吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。

测定管吸光度减去对照管吸光度后（A 测定-A 对照），从标准曲线查得 AST 活力单位。 

参考范围： 

成年健康人血清 AST：8-28 卡门单位/ml

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。