抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)检测试剂盒
产品简介:
抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP/TRACP)活性不被酒石酸抑制,而其他 ACP 受到酒石酸抑制。
抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)检测试剂盒利用上述原理,来测定TRACP 的活性。TRACP 酶催化底物水解,产生游离酚;酚与重氮盐反应生成有色偶氮化合物,在 530nm 处比色测定,通过计算可测出酶的活力。
本试剂盒测仅用于科研领域,不可用于临床诊断或其他用途。
可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内 pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。
可以为您提供各种颜色的 M 系列、N 系列、L 系列、E系列、G 系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
产品应用:
分光光度计
使用方法:
1.试剂 A 若出现结晶,可在沸水浴中隔水加热溶解即可;
试剂配制
1. 试剂 B 的配制:
使用时每支组分 B1 加一瓶稀释液 B2 配制成工作液 B。
配好的试剂 2-8℃保存一周有效;
2. 试剂 C 的配制:
使用时组分 C1 加一瓶稀释液 C2 配制成工作液 C。
配好后的 C 工作液 2-8℃避光;
样本处理
1. 血清(浆)样本:
血清(浆)直接加样。
2. 组织样本:
准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1:9 的比例,加入 9 倍体积的生理盐水,冰水浴条件下机械匀浆,2500 转/分,离心 10 分钟,取上清液待测(即 10%的匀浆上清液),同时用考马斯亮蓝蛋白定量试剂盒测定组织蛋白浓度。
定义及计算:
一、血清(浆)中 TRACP 的计算
1. 定义:1L 血清在 37℃与底物作用,1min 产生 1umol 的游离酚为一个活力单位。
2. 计算公式:
TRACP 活力(U/L)= 测定 OD-对照 OD × 1 ×反应液总体积
呈色物微摩尔消光系数 比色光径 x 反应时间 取样量
注:呈色物微摩尔消光系数为 12.8 x 10-3L. umol-1.cm-1
3. 计算举例:
取血清按上表操作测得对照管 OD 值为 0.019,测定管 OD 只为 0.048,则计算如下:
TRACP 活力 = 0.048-0.019 X 1 X2.45 = 7.391U/L
(U/L) 12.8X10-3 15 0.05
二、组织中 TRACP 的计算
1. 定义:每 g 组织蛋白 37℃与底物作用,1min 产生 1umol 的游离酚为一个活力单位。
2. 计算公式:
TRACP 活力(U/gprot)= 测定 OD-对照 OD× 1 ×反应液总体积
呈色物微摩尔消光系数 比色光径 x 反应时间 取样量 ÷ 待测样本蛋白浓度(g/L)
注:呈色物微摩尔消光系数为 12.8 x 10-3L. umol-1.cm-1
3. 计算举例:
取小鼠后腿肌肉,制成 10%匀浆,3500 转/分,离心 10 分钟,取上清按操作表进行检测。测得对照管 OD 值为 0.031,测定管 OD 值为 0.128,同时测得蛋白含量为 9.412gprot/L,则计算如下:
TRACP 活力 = 0.128-0.031 X 1 X 2.45 ÷ 9.412 gprot/L=2.641 U/ g(U/g) 12.8X10-3 15 0.05
注意事项:该产品仅供科研实验使用,未经允许不得用于其它用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。