植物总酚测试盒
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
植物酚类物质具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有较高的营养价值和医疗保健作用而广泛应用于化妆品、食品、医药等领域。
测定原理
在碱性条件下,酚类物质将钨钼酸还原,产生蓝色化合物,在 760nm 处有特征吸收峰,测760nm 处的吸光值,即可得样品总酚含量。
自备实验用品及仪器
天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制
提取液:60%乙醇,自备。
试剂一:液体 6mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 15mL×1 瓶,4℃保存。
总酚提取
将样本烘干至恒重,粉碎,过 40 目筛之后,称取约 0.1g,加入 2.5mL 提取液,60℃振荡提取 2h。10000g,25℃,离心 10min,取上清,用提取液定容至 2.5mL,待测。
测定操作表
总酚含量计算公式
标准曲线:y = 5.615x+0.0012,R2 = 0.9994
总酚含量(mg/g 干重)=(A760-0.0012)÷5.615×V 样÷(V 样÷V 样总×W)= 0.445×(A760– 0.0012 )÷WV 样总:加入提取液体积,2.5mL; V 样:反应中样品体积,0.05mL; W:样品质量,g
注意事项
1. 吸光值大于 2,样品适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数。
2. 试剂一对皮肤有一定的刺激性,请操作时做好防护措施。
3. 最低检出限为 2.4 μg/g。