植物铵态氮测试盒
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
氮素是构成生物体的一种必需元素,自然界中的氮素循环包括许多转化作用。空气中的氮气被固氮微生物及植物与微生物的共生体固定成氨态氮,经过硝化微生物的作用转化成硝态氮,后者被植物或微生物同化成有机氮化物,植物组织氨氮含量可反映植物受胁迫的程度。
测定原理
铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用,生成水溶性染料靛酚蓝,在 625nm 处有特征吸收峰,吸光值与铵态氮含量成正比。
自备实验用品及仪器
天平、常温离心机、分光光度计、1mL 玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制
提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×2 瓶,4℃避光保存。临用前根据用量每瓶加 15mL 蒸馏水溶解,现配现用。
试剂二:液体 30mL×1 瓶,4℃避光保存。
样本处理
按照样本质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 新鲜样本,加入1mL 提取液)室温匀浆后,12000g ,4℃离心 10min,取上清液待测。
测定操作表
1、 分光光度计预热 30min,调节波长至 625nm,蒸馏水调零。
2、 操作表
计算公式
标准曲线:y = 0.0374x - 0.0623,R2 = 0.9989;x 为标准品(NH4+)浓度 μg/mL,y 为吸光值△A。
NH4+—N 含量(μg/g 鲜重)=(△A+0.0623)÷ 0.0374÷W×14÷18 =20.8×(△A+0.0623)÷WW:样本质量,g;14:N 的分子质量;18:NH4+的分子质量。
注意事项
1. 试剂一必须避光低温保存,配制好的试剂一 4℃保存不能超过 20 天。
2. 提取好的待测液尽快测定,低温保存不得超过 24 小时。