在线客服
热线电话

微信公众号

企业微信
我的购物车 0

羟脯氨酸(HYP)测试盒 BES-BK2551B

羟脯氨酸(HYP)测试盒

销售价
¥ 330.00 /盒
市场价
¥350.00
  • 累计评价

    0
  • 累计销量

    0
配送至
请选择地址
可配送 快递:免邮
服务
博尔森生物科技有限公司-科研服务一站式网站发货并提供售后服务

数量
+ -
库存99盒
二维码图片
商家服务
优质服务 售后无忧
高效物流 安全配送
一站式采购
会员特权 优惠不断
文献奖励

看了又看

  • 吡咯啉-5-羧酸还原酶(P5CR)测试盒 BES-BK2560B

    ¥830.00

  • 鸟氨酸转氨酶(OAT)测试盒 BES-BK2559B

    ¥530.00

  • 赖氨酸(LYS)测试盒 BES-BK2558B

    ¥530.00

羟脯氨酸(HYP)测试盒

注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

HYP 是机体胶原蛋白主要成分之一,胶原蛋白大多分布于皮肤、腱、软骨和血管等,因此HYP 含量是反映胶原组织代谢及纤维化程度的一项重要指标。

测定原理

样品经酸水解产生游离的 HYP,进一步被氯胺 T 氧化,氧化产物与对二甲氨基苯甲醛反应,产生红色化合物,在 560nm 处有特征吸收峰。通过测定样品水解液 560nm 吸光值,可计算HYP 含量。

自备实验用品及仪器

天平、烘箱、玻璃管、离心机、水浴锅、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、无水乙醇、异丙醇、6mol/L 盐酸和蒸馏水。

试剂组成和配制

组织提取液:6mol/L 盐酸,自备。浓盐酸:H2O(V/V)= 1:1,室温保存。

细胞提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 10mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 10mL×1 瓶,4℃避光保存。

羟脯氨酸提取

1. 组织:称取约 0.5g 样品于玻璃管,加入 5mL 的组织提取液,置于 110℃烘箱,水解 6至 12 小时,用提取液定容至 5mL,12000g,25℃,离心 20min,取上清待测。

2. 细胞:取 500 万个细胞,加入 2mL 的细胞提取液,于高压消毒器中 15 磅保持 30min,自然降压后待测。

3. 血清游离羟脯氨酸提取:取 0.2mL 血清,加入 1mL 无水乙醇使蛋白质沉淀,8000g4℃离心 5min。将上清倒入另一个 EP 管,氮吹或沸水浴将乙醇挥发干。冷却后再加入0.4mL50%异丙醇,充分溶解混匀待测。

测定操作表

2021091711382018988

羟脯氨酸含量计算公式

标准曲线:y=64.875x+ 0.0251,R2=0.9991

(1)按组织计算

HYP 含量(mg/g 鲜重)=(ΔA -0.0251)÷64.875×V 反总÷(V 样÷V 样总×W) = 0.385×(ΔA -0.0251)÷W

(2)按细胞计算

HYP 含量(mg/104 cell)=(ΔA -0.0251)÷64.875×V 反总÷V 样×V 样总÷细胞数量(万个)= 0.154×(ΔA -0.0251)÷细胞数量(万个)

(3)按液体体积计算

HYP 含量(mg/mL)=(ΔA -0.0251)÷ 64.875×V 反总÷V 样×2 = 0.154×(ΔA -0.0251)V 反总:反应总体积,1mL;V 样:反应中样品体积,0.2mL;V 样总:加入提取液体积, mL;W:样品质量,g;2,血清吹干后复溶的倍数。

注意事项

1、 OD 值大于 0.8,样品适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数。

2、 试剂有一定的毒性,请操作时做好防护措施,防止吸入或与皮肤接触。

3、 最低检出限为 3.8mg/L。


因厂家更改商品包装、场地、附配件等不做提前通知,且每位咨询者购买、提问时间等不同。为此,客服给到的回复仅对提问者3天内有效,其他网友仅供参考!给您带来的不便还请谅解,谢谢!

  • 全部
  • 商品咨询
  • 支付问题
  • 发票及保修