细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法) 

产品简介：

自噬(autophagy)是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器，最终将吞食物在溶酶体内降解的过程，自噬体(autophagosome)为双层膜包被的圆形或椭圆形结构，内含细胞质、长寿蛋白质和异常蛋白聚集物，损伤或多余细胞器如线粒体、粗面内质网和微体、病毒和细菌等。

单丹磺酰尸胺(Dansylcadaverine,MDC )是一种荧光色素，是嗜酸性染色剂，通常被用于检测自噬体形成的特异性标记染色剂，其检测激发滤光片波长 355nm。阻断滤光片波长 512nm。细胞自噬染色检测试剂盒(MDC 法)，适用于培养细胞的自噬染色，又称为 MDC 染色液，可与 EB 合用双染。

产品组成：

自备材料：

1、荧光显微镜

2、低速离心机

3、EB

4、载玻片、盖玻片

操作步骤(仅供参考)：

(一)MDC 单独染色：

1、用去离子水稀释 10×Wash buffer 至 1×。

2、800g 离 5min，收集细胞，用 300～400μl 的 1×Wash buffer 清洗细胞 1 次，弃上清。

3、加入适量的 1×Wash buffer 重悬细胞，计数并调节细胞浓度至 106/ml。

4、取适量 90μl 的细胞悬液至新的 EP 管中，加 10μl 的 MDC Stain，轻轻混匀。

5、室温避光染色 15～45min。

6、800g 离心 5min，收集细胞，用 300～400μl 的 1×Wash buffer 清洗细胞 2 次，弃上清。

7、加入 100μl 的 Collection buffer 重悬细胞，滴加于载玻片上并加盖玻片。

8、荧光显微镜下观察(激发波长 355nm，发射波长 512nm)，计数并拍照。

(二)与 EB 双染色：

1、用去离子水稀释 10×Wash buffer 至 1×。

2、800g 离心 5min，收集细胞，用 300～400μl 的 1×Wash buffer 清洗细胞 1 次，弃上清。

3、加入适量的 1×Wash buffer 重悬细胞，计数并调节细胞浓度至 106/ml。

4、取适量 90μl 的细胞悬液至新的 EP 管中，分别加入 10μl 的 MDC Stain 和 0.2uM EB染色液，轻轻混匀。

5、滴加于在玻片上，室温避光染色 15～30min，加盖玻片。

6、荧光显微镜下观察(激发波长 355nm，发射波长 512nm)，计数并拍照。

染色结果：

注意事项：

1、MDC Stain 和 EB 试剂有一定毒性，请小心操作。

2、吖啶橙染色常与 EB 染色合用，可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

3、操作过程中应注意减少试剂暴露于强光下的时间。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

产品货号：BES2224CS

产品规格：100T

有效期：12个月有效。

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。