酵母活性检测试剂盒-AlamarBlue

产品简介：

AlamarBlue 酵母活性检测试剂盒是应用新型的氧化还原指示剂阿尔玛蓝快速高灵敏度检测酵母活性的比色检测产品。

 AlamarBlue 是一种氧化还原指示剂，能根据酵母的代谢活性产生吸光度变化和荧光信号。这种测定是基于具有代谢活性的细胞将试剂转换成荧光和比色指示剂的能力。 受损和无活性细胞具有较低的天然代谢活性，因此对应的信号较低。

 AlamarBlue 在氧化状态下呈现紫蓝色无荧光性，而在还原状态下，转变为呈粉红或红色荧光的还原产物，其吸收峰为 530-560nm，而散射峰为590nm。在酵母细胞增殖过程中，细胞内处于还原环境。进入酵母细胞内的活性检测染料被代谢中间体及细胞色素类还原后释放到酵母细胞外并溶于培养基中，使培养基从无荧光的靛青蓝变成有荧光的粉红色。最后用普通分光光度计或荧光光度计进行检测，吸光度和荧光强度与活性酵母细胞数成正比。染料经过验证安全无毒，可以用于酵母细胞活性和酵母细胞增殖的定量分析细胞毒性研究。 

 AlamarBlue 的无毒特性使酵母细胞可长期暴露于这种染料，因此可随时间进行测量或进行终点测量。

 AlamarBlue 法采用单一试剂，可以连续、快速地检测酵母细胞的增生状态。由于 AlamarBlue 对酵母细胞无毒、无害，不影响细胞的蛋白质合成与分泌等活性，因此可以对同一批酵母细胞的增生状态进行连续观察和进一步的实验观察，因此有操作简便和几乎不干扰酵母细胞正常代谢的特点。

产品应用：

酶标仪或分光光度计

产品特点：

1.使用方便：仅使用单一试剂；

2.灵敏度高，数据可靠，重现性好，线性范围更宽；

3.结果稳定：试剂本身稳定性高，实验结果稳定可靠；

4.无需放射性同位素和有机溶剂，对微生物毒性低；

5.适合于高通量药物筛选。

使用方法：

1.正式实验前，建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入 Alamar Blue 试剂后的培养时间。

2.整个过程均应为无菌操作，因为微生物污染物同样可以还原检测试剂而影响实验结果。

3.注意接种细胞浓度和加入检测试剂后孵育时间。细胞浓度过高或孵育时间过长，会导致继发性还原反应，产生无色和荧光消失。

4.孵育时，须避光。

5.本产品可以使用荧光或分光光度检测，但荧光的灵敏度高，实验误差小，推荐使用荧光检测。

1. 收集待检测的酵母细胞。

2. 用 PBS 或生理盐水洗涤酵母细胞 2 次。

3. 将酵母细胞用 PBS 重悬，调整细胞悬液浓度为 1x107/ml。

4. 96 孔板中每孔加入 200 微升细胞悬液。将 AlamarBlue 活性检测试剂于洁净工作台内按 10 微升/孔加入微孔板中，在细胞培养箱内继续孵育 2－12 小时，液体颜色部分出现由蓝变为粉红为止（如采用荧光分光光度法，只需孵育 0.5－6 小时）； 

5. 在 570nm 测定吸光度，参考波长 600nm。如无此滤光片， 可用 565 nm 和 610 nm 的滤光片替代。 

6. 也可用荧光分光光度法检测荧光强度，激发光波长在 530-560 nm 之间，发射光波长为 590 nm。

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。