WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

产品简介：

WST-1 细胞增殖检测试剂盒采用 WST-1 检测细胞活性、增殖、毒性等的试剂盒。可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测，或一些药物诱导的细胞生长抑制检测等。

 WST-1 是广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂。WST-1 是一种类似于 MTT 的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的 formazan。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。

 WST-1 是 MTT 的一种升级替代产品，和 MTT 或其它 MTT 类似产品如 XTT、MTS 等相比有明显的优点。首先，MTT 被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的 formazan 不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而 WST-1 产生的 formazan 是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。WST-1 产生的 formazan 比 XTT 和 MTS 产生的 formazan 更易溶解。WST-1 比XTT 和 MTS 更加稳定，使实验结果更加稳定。另外，WST-1 和 MTT、XTT 等相比，线性范围更宽，灵敏度更高。

 WST-1 细胞增殖检测试剂盒使用时无须同位素，所有的检测步骤仅在同一块 96 孔板内完成。不必洗涤细胞，不必收集细胞，也不必采用额外步骤去溶解formazan。WST-1 对细胞无明显毒性。加入 WST-1 显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读板，使检测时间更加灵活，便于找到最佳测定时间。

 可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。

可以为您提供各种颜色的系列、N 系列、L 系列、E系列、G 系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。

 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

产品应用：

酶标仪

产品特点：

1.使用方便：仅使用单一试剂；

2.结果稳定：试剂本身稳定性高，实验结果稳定可靠；

3.线性范围更宽，灵敏度更高。

使用方法：

1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

2.接种时注意细胞悬液一定要混匀，以避免细胞沉淀下来，导致每孔中的细胞数量不等，可以每接种几个孔就混匀一下。培养板周围一圈孔培养基容易挥发，为了减少误差，建议培养板的四边每孔只加培养基，而不作为指标检测孔。

3.有条件的情况下建议采用多通道移液器，可以减少平行孔间的差异。

4.若细胞培养时间较长，培养基颜色发生变化或 pH 发生变化，建议更换新鲜的培养基后再加 WST-1 试剂。含有酚红的培养基可用于本试剂盒做细胞活性的测定。

5.如果不是使用 96 孔板检测，WST-1 溶液的用量相应等比例增加即可。

1. 加细胞悬液 100ul（约 5000-10000 个细胞）到 96 孔板（边缘孔用无菌水或 PBS 填充）。每板设对照（加100l 培养基）。

2. 置 37℃，5% CO2 孵育过夜，倒置显微镜下观察。

3. 每孔加入 10 ul 待检测药物溶液， 37℃孵育。

4. 每孔加入 10 ul WST-1 溶液，37℃孵育 1-4 小时。

5. 测定 450 nm 各孔的吸光值，如无 450nm 滤光片，可以使用 430-480nm 的滤光片。

6. 同时设置空白孔（培养基和 WST-1 溶液，无细胞），对照孔（不加药培养基和 WST-1 溶液，有细胞），每组设定 3-5 复孔。 

结果分析 ：

细胞活力计算：

将各测试孔的 OD 值减去空白孔 OD 值。各重复孔的 OD 值取平均数。 

细胞活力% =（加药细胞 OD-空白 OD/对照细胞 OD-空白 OD）×100

常见问题分析：

1、 每孔接种细胞数量多少？

标准 96 孔板时，贴壁细胞的最小接种量为 1,000 个/孔 (100 μl 培养基)。预先在 1,000-100,000 个/孔范围内摸索条件。如果要使用 24 孔板或 6 孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的 10%加入试剂。

2、 酚红和血清影响实验结果吗？

酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响。

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。