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外泌体提取试剂盒(细胞培养上清或尿液) BES2002EXO

是由不同细胞分泌的直径 30-150nm 的胞外膜性囊泡 (Extrocellular visicles,EVs)。

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外泌体提取试剂盒(细胞培养上清或尿液) 

保存与应用 

【保存条件】 

本试剂盒室温下运输,室温或 2-8℃下保存 12 个月(按照试剂盒不同成分分别 保存),使用前请充分混匀。 

【应用范围】 本产品只用于科学研究,不能用于临床诊断。 本试剂盒提取的外泌体可用于 NTA 粒径分析,Western Blot,核酸提取及其 后续分析(Q-PCR,测序等),不建议用于外泌体标记和蛋白质质谱分析等。

产品介绍 

外泌体(Exosome)是由不同细胞分泌的直径 30-150nm 的胞外膜性囊泡 (Extrocellular visicles,EVs)。外泌体普遍存在于多种体液中,其内容物丰富, 包括蛋白质、脂质、核酸等,在细胞间信息交流中发挥着重要作用,主要参与免 疫抗原呈递,神经递质传递,脂类代谢,及细胞信号转导等过程,并与多种疾病 的发生、发展、治疗及预后密切相关。

密度超速离心作为传统并有效的外泌体分离方法,但其复杂的操作流程,昂 贵的仪器设备,限制了外泌体的常规研究。本公司研制一种外泌体提取试剂,通 过优化多聚物混合物与样品混合,经离心可将外泌体沉淀富集,其操作简单,用 时短,结果稳定,污染蛋白含量较少,只需普通离心机就可以分离得到较纯的完 整外泌体。

试剂盒组成和说明 

本试剂盒只适用于细胞培养上清或尿液的外泌体提取。

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本试剂盒每个反应是基于至少 5.0ml 细胞培养上清或尿液作为外泌体提取样品, 如果提取的外泌体用于提取核酸(RNA/DNA)和蛋白质,建议起始样品用量为 10.0ml,具体见下表。

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操作方法

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图 1 简单操作流程图

1. 样本预处理 

对于冻存样品,室温或 25℃水浴解冻,将完全融化的样品置于冰上;对于 新鲜样品,收集样品后置于冰上,3,000×g,4℃离心 15min,去除细胞或细胞碎 片,离心后将上清吸入新管中。 

2. 沉淀外泌体 

取至少 5.0ml 处理后的细胞培养上清或尿液放入 15ml 离心管中,加入 1.25ml 外泌体沉淀试剂,颠倒充分混匀后 4℃静置至少 30min。静置后的样品 12,000×g, 4℃离心 30min,管底可见白色沉淀,吸去上清,注意不要破坏外泌体沉淀。 

3. 外泌体重悬 

加入 100ul 1×PBS,或下游应用的相应缓冲液,用移液器反复吹打或漩涡混 合均匀,彻底溶解沉淀,此重悬液中含有完整的外泌体。 

4. 外泌体纯化 

将重悬的外泌体转移至纯化柱,放入 1.5ml 收集管中(试剂盒提供),2,000×g, 4℃离心 5min,弃掉纯化柱,收集管中为提取的外泌体。提取的外泌体可直接应用于下游实验(如,粒径分析、核酸提取等),或者储存在 2-8℃保存一周,或者 -80℃保存大约三个月。

用途:该产品仅验使用,未经允许不得用于其它用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。



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