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液体样本总抗氧化能力检测试剂盒(Cu2+法) BES-BK2757B

Liquid Sample Total Antioxidant Capacity Assay Kit

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液体样本总抗氧化能力检测试剂盒(Cu2+法)


产品说明:

液体样本总抗氧化能力检测试剂盒(Cu2+法),即Total Antioxidant Capacity Assay Kit with Copper Ion Method是一种灵敏简单的检测总抗氧化能力(Total Antioxidant Capacity,TAOC)的试剂盒。

原理:Cu2+法测定TAOC的原理是利用样品中抗氧化物还原Cu2+为Cu+,Cu+与反应体系中Cu2+螯合剂螯合,通过570nm吸光度可以测定Cu+产生量,从而测定样品TAOC。利用具有强抗氧化能力的Trolox为标准品,可以计算样品以Trolox为参照的TAOC。

本试剂盒方便快捷,加入待测样品30分钟即可进行吸光度测定。


组成:

(1)Cu+螯合剂溶液    25ml/瓶

(2)Cu2+溶液 0.5ml/管

(3)10 mM Trolox标准品溶液   0.5ml /管


储存条件:

-20℃储存,一年有效。


所需设备:

酶标仪 最佳波长570nm


适用范围:

测定各类动物血清、血浆、唾液、尿液等。


操作步骤:

1. 样品的准备

1.1 血清、血浆、唾液或尿液样品的准备:血清、血浆、唾液或尿液样品,都可以直接用于测定。不立即测定的样品可以-70℃保存。如果样品中总抗氧化能力超出测定范围,可利用PBS适当稀释后测定,稀释倍数请通过预实验确定。

1.2 其它样品的准备:植物或中草药提取物都可以直接用于检测。需要注意样品本身的颜色不能干扰检测。

2. 试剂盒的准备

总抗氧化能力检测工作液的配制:按下表比例取Cu+螯合剂溶液和Cu2+溶液配制总抗氧化能力检测工作液。


1个样品

10个样品

50个样品

Cu+螯合剂溶液

200 μl

2 ml

10 ml

Cu2+溶液

4 μl

40μl

200 μl

3. 标准品的准备

利用PBS将10mM的Trolox溶液稀释成1、0.5、0.25、0.125、0.062、0.031 mM浓度的Trolox溶液,用于标准曲线测定。每次测定新鲜配制系列标准品稀释液。

4. 测定方法

4.1参考下表,使用96孔板,依次加入总抗氧化能力检测工作液、样品或标准品后,混匀,室温孵育30分钟。


空白对照

标准曲线

样品

总抗氧化能力检测工作液

200μl

200μl

200μl

标准品

10μl

样品

10μl

PBS

10μl

室温孵育

30min

30min

30min

4.2 孵育结束后,利用酶标仪测定A570nm。如果样品吸光度过高,可适当稀释样品后测定,如果样品吸光度过低,可适当冷冻干燥浓缩样品后测定。

5. 数据处理

利用标准品浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标制作Trolox抗氧化能力标准曲线,并获得横纵坐标之间的函数关系式,然后利用标曲和各样品的吸光度值计算样品的总抗氧化能力。 Trolox抗氧化能力标曲如下图所示:



注意事项:

1. 本试剂盒检测涉及氧化还原反应,很多氧化剂和还原剂都会干扰试剂盒的测定,特别是巯基乙醇、DTT等含有巯基的试剂会严重干扰本试剂盒的测定,请尽量避免。

2. 每次测定同时利用标准品制作标准曲线。

3. 初次使用试剂盒时,粉末试剂和小体积液体试剂请适当离心后使用。

4. 本产品仅限专业人员用于科学研究,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


用途:该产品仅供科研实验使用,未经允许不得用于其它用途!


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