线粒体膜电位荧光探针-罗丹明123

产品描述：

线粒体膜电位荧光探针罗丹明 123（Rh123）是一种可对活细胞线粒体染色的荧光染料，分子式:C21H17ClN2O3，分子量: 380.8243，为红色至棕色粉末。Rh123 可以快速通过细胞膜，仅需几分钟就可以被具有活性的线粒体俘获，选择性地聚集在线粒体内，呈黄绿色荧光。对细胞没有任何毒性。Rh123 广泛用作检测线粒体膜电位，也常用于细胞凋亡检测。

规格：（100 次，50 次减半）

罗丹明 123 荧光探针浓缩液（1mM） 100ul

储存:

 -20℃避光保存，一年有效

波长：

最大激发波长为 507nm，最大发射波长为 529nm。可以使用激发波长 511nm,发射波长 535nm 或激发波长 488～505nm，发射波长 530nm

操作步骤:

罗丹明 123 荧光探针工作液配制：

用无酚红、不含血清的新鲜培养基稀释罗丹明 123 荧光探针浓缩液（1mM）至 1~20uM，最佳工作浓度建议预实验确定。

一般情况下，96 孔板单孔细胞样本 50ul 工作液足够检测，6 孔板单孔 0.5ml 工作液足够检测。

悬浮细胞：

1. 离心收集细胞，弃上清，用 PBS 洗涤两次。

2. 按比例将 Rh123 工作液加入细胞，37℃孵育 30 分钟至 1 小时。

3. 离心，去除 Rh123 缓冲液，用新鲜培养基洗涤细胞。

4. 加入 4%组织细胞固定液（货号 B1057）固定 15~20 分钟，用 PBS 洗涤。

5. 用荧光显微镜观察。

贴壁细胞：

1. 用载玻片准备细胞爬片，细胞数目应为 5×104～5×105 个/mL 或消化收集细胞后，

2. 孵育该载玻片，细胞贴壁后用 PBS 或 Hank's 液洗涤细胞。

3. 将 Rh123 工作液加至附有细胞的载玻片上，37℃孵育 30 分钟至 1 小时。

4. 去除 Rh123 缓冲液，并用培养基洗涤细胞。

5. 加入 10%福尔马林缓冲液固定 15~20 分钟，用 PBS 洗涤。

6. 荧光显微镜观察细胞。

也可以消化收集细胞后参照悬浮细胞处理方式进行膜电位检测。

结果：正常细胞线粒体呈黄绿色荧光；凋亡细胞荧光强度减弱或消失。

说明

1. 操作时需戴手套。

2. 罗丹明 123 为通透性染料，可以自由进入细胞。

3. 孵育时，必须避免光照。

4. 染色完成后，即可进行荧光检测分析。

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！