在线客服
热线电话

微信公众号

企业微信
我的购物车 0

海藻糖含量测试盒 BES-BK2081B

海藻糖含量测试盒

销售价
¥ 660.00 /盒
市场价
¥680.00
  • 累计评价

    0
  • 累计销量

    0
配送至
请选择地址
可配送 快递:免邮
服务
博尔森生物科技有限公司-科研服务一站式网站发货并提供售后服务

规格
测试方法
数量
+ -
库存99盒
二维码图片
商家服务
优质服务 售后无忧
高效物流 安全配送
一站式采购
会员特权 优惠不断
文献奖励

看了又看

  • 海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)测试盒 BES-BK2089B

    ¥1280.00

  • 海藻糖-6-磷酸酯酶(TPP)测试盒 BES-BK2088B

    ¥2180.00

  • 海藻糖合成酶(TS)测试盒 BES-BK2087B

    ¥1030.00

海藻糖含量测试盒

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

海藻糖广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。由于海藻糖具有独特的不同于其他碳水化合物的生物学特性,能在干旱、高温、脱水、冷冻、高渗透压及毒性物质等恶劣环境下保护生物体细胞蛋白质、脂肪、糖类、核酸等组分不受损害。

测定原理:

蒽酮比色法。具有灵敏度高﹑简便快捷﹑适用于微量样品的测定等优点。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板﹑研钵、浓硫酸(不允许快递)和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100ml×1 瓶,4℃保存;

试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存;

海藻糖提取:

1、细菌或细胞处理:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3S,间隔 10S,重复 30 次),室温静置 45min,振荡 3~5 次,冷却后,8000g,25℃离心 10min,取上清。

2、组织的处理:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织,加入 1mL 提取液),冰浴匀浆,室温静置 45min,振荡 3~5 次,冷却后,8000g,25℃离心 10min,取上清。

3、血清(浆)的处理:按照血清(浆)体积(mL):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取 0.1mL 血清(浆)加入 1mL 提取液),冰浴匀浆,室温静置 45min,振荡 3~5 次,冷却后,8000g,25℃离心 10min,取上清。

测定步骤:

1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 620nm,蒸馏水调零。

2、 调节水浴锅至 95 度。

3、工作液的配制:临用前在试剂一中加入 3.75mL 蒸馏水后,缓慢加入 21.25mL 浓硫酸,不断搅拌,充分溶解,待用;用不完的试剂 4℃保存一周;

4、样本测定:取60μL样本和240μL工作液至EP管中,95度水浴10 min(盖紧,防止水分散失),自然冷却至室温,取200uL至微量石英比色皿或96孔板中,在620 nm 波长下记录测定吸光度值A。

注意:由于工作液具有强腐蚀性,请谨慎操作。 若吸光值大于1,请将样本用提取液稀释后再测定,计算公式中乘以相应的稀释倍数。

海藻糖含量计算:

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

1、标准条件下测定回归方程为 y = 8.8976x+0.0729;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。

2、按样本鲜重计算:

海藻糖含量(mg/g 鲜重)= [V1×(A -0.0729)÷8.8976]÷(W×V1÷V2)=0.112×(A -0.0729) ÷W。

3、按样本蛋白浓度计算:

海藻糖含量(mg/mg prot)= [V1×(A -0.0729) ÷8.8976]÷(V1×Cpr)=0.112×(A -0.0729) ÷Cpr。

4、按细菌或细胞密度计算:

海藻糖含量(μg/104

cell)=[1000×V1×(A -0.0729) ÷8.8976]÷(500×V1÷V2)=0.224×(A-0.0729)

5、血清(浆)海藻糖含量计算

海藻糖含量(mg/mL)=[V1×(A -0.0729)÷8.8976 )÷(V3×V1÷V2)=1.12×(A -0.0729)1000:1mg/mL=1000µg/mL;V1:加入反应体系中样本体积,60μL=0.06mL;V2:加入提取液总体积 1mL;;V3:加入血清(浆体积),0.1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g;500:细菌或细胞总数,500 万。

b.用 96 孔板测定的计算公式如下

1、标准条件下测定回归方程为 y = 4.4488x+0.0729;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。

2、按样本鲜重计算:

海藻糖含量(mg/g 鲜重)=[ V1×(A -0.0729)÷4.4488]÷(W×V1÷V2)=0.224×(A -0.0729) ÷W。

3、按样本蛋白浓度计算:

海藻糖含量(mg/mg prot)= [V1×(A -0.0729)÷4.4488]÷(V1×Cpr)=0.224×(A -0.0729) ÷Cpr。

4、按细菌或细胞密度计算:

海藻糖含量(μg/104

cell)=[1000×V1×(A-0.0729)÷4.4488]÷(500×V1÷V2)=0.448×(A -0.0729)

5、血清(浆)海藻糖含量计算

海藻糖含量(mg/mL)=[V1×(A -0.0729)÷4.4488 )÷(V3×V1÷V2)=2.24×(A -0.0729)1000:1mg/mL=1000µg/mL;V1:加入反应体系中样本体积,60μL=0.06mL;V2:加入提取液总体积 1mL;;V3:加入血清(浆体积),0.1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500 万。

注意:最低检测限为 10μg/g 鲜重或 0.1μg/ mg prot


因厂家更改商品包装、场地、附配件等不做提前通知,且每位咨询者购买、提问时间等不同。为此,客服给到的回复仅对提问者3天内有效,其他网友仅供参考!给您带来的不便还请谅解,谢谢!

  • 全部
  • 商品咨询
  • 支付问题
  • 发票及保修