在线客服
热线电话

微信公众号

企业微信
我的购物车 0

苹果酸合酶(MS)测试盒 BES-BK2073B

苹果酸合酶(MS)测试盒

销售价
¥ 5180.00 /盒
市场价
¥5200.00
  • 累计评价

    0
  • 累计销量

    0
配送至
请选择地址
可配送 快递:免邮
服务
博尔森生物科技有限公司-科研服务一站式网站发货并提供售后服务

规格
测试方法
数量
+ -
库存99盒
二维码图片
商家服务
优质服务 售后无忧
高效物流 安全配送
一站式采购
会员特权 优惠不断
文献奖励

看了又看

  • 柠檬酸合酶(CS)测试盒 BES-BK2079B

    ¥1180.00

  • 柠檬酸合酶(CS)测试盒 BES-BK2078B

    ¥2180.00

  • 苹果酸合酶(MS)测试盒 BES-BK2080B

    ¥3180.00

苹果酸合酶(MS)测试盒

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

苹果酸合酶(MS,EC 4.1.3.2)是属于转移酶中酰基转移酶的一类,主要存在于植物和微生物中。MS 是乙醛酸循环的关键酶之一,在 MS 催化下乙醛酸与乙酰辅酶 A 反应生成苹果酸。

测定原理:

MS 催化乙酰 CoA 和乙醛酸产生苹果酸,同时生成辅酶 A,辅酶 A 使无色的 DTNB 转变成黄色的 TNB,在 412nm 处有特征吸光值。

需自备的仪器和用品:

酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、96 孔板、研钵、冰、和蒸馏水试剂组成和配制:

试剂一:液体 120 mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 10 mL×1 瓶,4℃保存;

试剂三:粉剂×1 瓶,-20℃保存;临用前加入 10mL 试剂一充分溶解后使用,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;

试剂四:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 2.4mL 试剂一充分溶解后使用,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;

样本的前处理:

1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):试剂一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

2、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

测定步骤:

1、酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 412nm。

2、样本测定在 96 孔板中依次加入 20μL 样本、80μL 试剂二,80μL 试剂三和 20μL 试剂四,混匀,立即记录 412 nm 处反应 5min 时的吸光值 A1 和 10min 时的吸光值 A2,计算 ΔA=A2-A1。

MS 活性计算:

(1)按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1 nmol TNB 定义为一个酶活力单位。

MS(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(V 样×Cpr) ÷T=294×ΔA÷Cpr此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2)按样本鲜重计算:

单位的定义:每 g 组织每分钟催化产生 1 nmol TNB 定义为一个酶活力单位。

MS(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V 样÷V 样总)÷T=294×ΔA÷W

(3)按细菌或细胞密度计算:

单位的定义:每 1 万个细菌或细胞每分钟催化产生 1 nmol TNB 定义为一个酶活力单位。

MS(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(500×V 样÷V 样总)÷T=0.588×ΔAV 反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:TNB 摩尔消光系数,1.36×104 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V 样:加入样本体积,0.02 mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500 万。


因厂家更改商品包装、场地、附配件等不做提前通知,且每位咨询者购买、提问时间等不同。为此,客服给到的回复仅对提问者3天内有效,其他网友仅供参考!给您带来的不便还请谅解,谢谢!

  • 全部
  • 商品咨询
  • 支付问题
  • 发票及保修